|
عنوان
|
شناسایی باکتری های همزیست غالب دستگاه گوارش بید غلاتSitotorga cerealella
|
|
نوع پژوهش
|
مقاله چاپ‌شده در مجلات علمی
|
|
کلیدواژه‌ها
|
باکتری های همزیست، بید غلات، دستگاه گوارش حشرات
|
|
چکیده
|
بید غلات از آفات مهم انباری است خسارت این آفت هم از نظر کیفیت و هم از لحاظ کمی دارای اهمیت زیاد است. در این پژوهش ، باکتریهای همزیست دستگاه گوارش بید غلات شناسایی شد. برای پرورش بید از غلات از جو اصلاح شده رقم آبیدر با درصد پروتئین بالا استفاده شد. ظرف حاوی جو بعد آلوده سازی در اطاقک رشد در شرایط دمایی 24±1 درجه سلسیوس و رطوبت نسبی 65±5 درصد نگهداری شدند. جهت جدا نمودن باکتری های دستگاه گوارش بید غلات از بین جمعیت پرورش داده شده 10 لارو سالم انتخاب شد. دستگاه گوارش لاروها پس از ضدعفونی در اتانول 70 درصد، هیپوکلریت سدیم 5 درصد و آب مقطر خارج شد. سپس جهت همگن نمودن دستگاه گوارش از یک میلی لیتر بافر فسفات 0.1 مولار با pH=7 استفاده شد. محتویات همگن و رقیق شده در محیط کشت نوترینت آگار کشت داده شد. برای انجام واکنشهای زنجیره ای پلیمراز از 5 میکرولیتر Master Mix، 2 میکرولیتر DNA استخراج شده ، 1.5 میکرولیتر پرایمر RP2 و 1.5 میکرولیتر پرایمر FD1 و 15 میکرولیتر Distilled Water که حجم کلی این مواد باید به 25 میکرولیتر برسد. فرآیند PCR لا استفاده از پرایمرهای عمومی FD1 و RP2 و توالی ژن 16srRNA در دستگاه ترموسایکلر انجام شد. توالی یابی محصول PCR تهیه شده با همکاری شرکت Bioneer کره جنوبی انجام شد و نتایج در سایت NCBI مورد بررسی قرار گرفت. ویژگی های فنوتیپی باکتری های جدا شده با روشهای استاندارد باکتری شناسی مشخص شد. بعد از بررسی تمامی کلونی های تهیه شده و مقایسه نتایج بدست آمده بیشترین فراوانی از نظر تعداد کلونی مختص به باکتری Enterococcus mundtii بود و باکتری Enterobacter hormaechei از فراوانی کمتری در دستگاهگوارش بید برخوردار بود. همچنین با توجه به الکتروفورز انجام شده بالاترین باندهای مشاهده شده مربوط به باکتری Enterobacter hormaechei و کوتاهترین باند متعلق به Enterococcus mundtii میباشد.
|
|
پژوهشگران
|
مجید کزازی (نفر اول)، راحله مرادی (نفر دوم)، غلام خداکرمیان (نفر سوم)، عزت اله صداقت فر (نفر چهارم)
|