مشخصات پژوهش

عنوان	مطالعه ایمنی زایی محصول ژن HSP70 کریپتوکوکوس نئوفورمنس از نظر تولید آنتی بادی در رت های مبتلا به عفونت کریپتوکوکی
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	کریپتوکوکوی نئوفورمنس، HSP70، تشخیص کریپتوکوکوزیس، الایزا
چکیده	کریپتوکوکوس نئوفورمنس، یک پاتوژن قارچی فرصت طلب مهم است که باعث رنجی از بیماری ها، از پنومونی خفیف تا عفونت های کشنده دستگاه عصبی مرکزی، در افراد دچار نقص سیستم ایمنی می شود و مسئول بخش عمده ای از مرگ های مرتبط با بیماری ایدز است. این مخمر در واکنش با سلول های میزبان، تعدادی پروتئین توسط سیستم ترشحی وزیکولی آزاد می کند، از جمله چپرون سلولی HSP70 ( پروتئین شوک حرارتی 70 کیلودالتونی ) که به عنوان یک ایمنوژن قوی در پاتوژن ها شناخته شده است. روش های اخیر برای تشخیص بیماری کریپتوکوکوزیس محدودیت هایی دارند. این مطالعه یک تحقیق کاربردی برای ارزیابی یک روش EIA جهت تشخیص زودهنگام و اولیه بیماری کریپتوکوکوزیس است که در آن ژن HSP70 به داخل یک وکتور تکثیری و سپس وکتور بیانی کلون شد. پروتئین HSP70 نوترکیب تخلیص و با روش های SDS-PAGE و Western blot مورد ارزیابی قرار گرفت و سپس برای ایمنی زایی یک خرگوش استفاده شد. سرم خرگوش ایمن شده، بر علیه پروتئین نوترکیب و عصاره سلولی مخمر کریپتوکوکوس نئوفورمنس در الایزا آزمایش شد. همچنین در این مطالعه با استفاده از آنتی بادی پلی کلونال تخلیص شده سرم خرگوش ایمن شده ، یک کیت الایزای ساندویچی طراحی شد و نمونه های سرم و CSF رت های آلوده شده با مخمر کریپتوکوکوس نئوفورمنس با استفاده از این کیت و روش های مرسوم تشخیص کریپتوکوکوزیس، مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که پروتئین HSP70 کریپتوکوکوس نئوفورمنس به عنوان یک پروتئین ایمنوژنیک قوی عمل می کند که بالاترین سطح آنتی بادی بعد از سومین تزریق یادآور به دست آمد و سرم خرگوش ایمن شده توانست عصاره مخمر را در الایزا شناسایی کند. همچنین کیت الایزای طراحی شده با استفاده از آنتی بادی پلی کلونال ضد HSP70، نسبت به رو ش های تشخیصی مرسوم تواناتر بوده است و می تواند به عنوان یک کاندید برای استفاده در کیت الایزای تشخیصی بر روی سرم انسان بررسی شود.
پژوهشگران	حسین رضوان (استاد راهنما)، شیما صفایی (دانشجو)، روح الله فاتح (استاد مشاور)، محمد خلیفه قلی (استاد مشاور)