|
عنوان
|
شناسایی و مطالعه بیان ژنهای دخیل در مسیر بیوسنتزی رزمارینیک اسید تحت تاثیر نانو لولههای کربنی و متیل جاسمونات در کشت قطعات گرهای گیاه مرزه خوزستانی
|
|
نوع پژوهش
|
پایان نامه
|
|
کلیدواژه‌ها
|
مرزه خوزستانی، سالیسیلیک اسید، متیل جاسمونات، نانو لولههای کربن چند جداره، رزمارینیک اسید
|
|
چکیده
|
گیاه مرزه خوزستانی از جمله گیاهان دارویی بومی ایران است که به عنوان منبع غنی از رزمارینیک اسید (RA) به کار میرود. این ماده دارای خواص آنتی اکسیدانی، ضد آلرژی و ضد سرطان است که در گیاهان خانواده نعناعیان به وفور یافت میشود و در مصارف صنعتی و پزشکی اهمیت ویژهای دارد. تکثیر با بذر و قلمه و خواب و رکود بذر از موانع عمده تولید این گیاه است. به همین دلیل استفاده از فنون کشت بافت حائز اهمیت میباشد. هدف از به نژادی گیاهان دارویی، افزایش میزان مواد موثره است که تولید آنها در طبیعت آهسته بوده و یا در معرض خطر انقراض قرار دارند. محرکهای غیر زیستی میتوانند میزان تولید متابولیتهای ثانویه را افزایش دهند. در این مطالعه، دو آزمایش مجزا صورت گرفت. در آزمایش اول به منظور افزایش میزان تولیدRA ، ژنهای کلیدی در مسیر بیوسنتز این ماده شامل رزمارینیک اسید سنتاز ( RAS)، فنیل آلانین آمونیالیاز (PAL)، تیروزین آمینوترانسفراز ( TAT) و هیدروکسی فنیل پیرووات ردوکتاز (HPPR)، در شرایط کشت قطعات گره شناسایی شده و برای اولین بار در این تحقیق جداسازی شدند. بیان ژنهای مذکور تحت تأثیر تیمارهای نانولولههای کربنی چند جداره (MWCNTs) و متیل جاسمونات (MeJA) هرکدام در چهار سطح با غلظت های 0، 50 ، 100 و 250 میلیگرم در لیتر بطور جداگانه بررسی گردید. در آزمایش دوم، اثر بالقوه MWCNTs با غلظت 100 میلیگرم در لیتر و سالیسیلیک اسید ( SA ) با غلظت 200 میلیگرم در لیتر هر کدام در زمانهای مختلف 0 ، 24 ، 48 و 72 ساعت در شرایط گلخانه بطور جداگانه بر میزان تولید RA بررسی شدند. محتوای RA ، فعالیت آنزیمهای کاتالاز ( CAT )، گایاکول پروکسیداز ( POD ) و آسکوربات پروکسیداز ( APX ) در هر دو شرایط گلخانه و آزمایشگاه و همچنین تست بتاکاروتن و DPPH در گیاهان کشت شده در شرایط گلخانه مورد بررسی قرار گرفت. تمامی آزمایشات در قالب طرح کاملا تصادفی در سه تکرار انجام شد. مقادیر RA در عصارههای حاصل از گیاهان رشد یافته در گلخانه و آزمایشگاه در هر دو آزمایش بسیار متغیر بود. بیشترین مقدار RA در شرایط کشت قطعات گره مشاهده شد. نتایج آزمایش اول نشان داد میزان بیان ژن های PAL ، TAT و HPPR تحت تیمار MWCNTs با غلظت 100 میلیگرم در لیتر افزایش و در غلظت 250 میلیگرم در لیتر کاهش یافت. ژن RAS در تمام غلظتهای به کار برده از تیمار MWCNTs افزایش بیان نشان دا
|
|
پژوهشگران
|
محمدرضا عبداللهی (استاد راهنما)، اصغر میرزائی اصل (استاد راهنما)، سیده فرزانه فاطمی اردستانی (دانشجو)، دارا دستان (استاد مشاور)
|