|
عنوان
|
جداسازی، شناسایی و کاربرد باکتریهای شکمبه ای مصرف کننده لاکتات به عنوان تغذیه مستقیم میکروبی در تغذیه گاوهای شیری
|
|
نوع پژوهش
|
پایان نامه
|
|
کلیدواژه‌ها
|
باکتریهای مصرف کننده اسیدلاکتیک، تغذیه ی مستقیم میکروبی، گاو شیری، pH
|
|
چکیده
|
هدف از انجام این طرح جداسازی و شناسایی باکتریهای مصرف کننده اسیدلاکتیک و استفاده از آن به صورت تغذیه مستقیم میکروبی در گاوهای شیری بود. در مرحله اول مطالعه، مایع شکمبه از گاوهای هلشتاین جمع آوری شده و با استفاده از محیط کشت اختصاصی، باکتریهای مصرف کننده ی اسید لاکتیک جداسازی شدند. با رنگ آمیزی جدایه های بدست آمده مشخص شد که تمام آنها کروی و گرم منفی بودند. چهار جدایه انتخاب و شناسایی آنها با استفاده از توالی یابی توالی نوکلئوتیدی RNAی ریبوزومی S16 انجام شد. نتایج توالی یابی نشان داد که جدایه ها بیشترین قرابت ژنتیکی را با باکتری مگاسفرا السدنی DSM20460 دارند. در مرحله دوم، توانایی جدایه ها در جلوگیری از تجمع اسید لاکتیک و حفظ pH در شرایط آزمایشگاهی مورد بررسی قرار گرفت. به این منظور دو آزمایش طراحی شد. در آزمایش اول دو سطح از هر چهار جدایه (SA1، SA2، SA3 و SA4) (یک میلی لیتر و نیم میلی لیتر حاوی 108×5 cfu/ml) در ویالهای حاوی مایع شکمبه و سوبسترای سریع تخمیر (شامل 90درصد گلوکز و 10درصد کاه) تلقیح شد. یک تیمار آنتی بیوتیک (ویرجینیا مایسین) و یک تیمار شاهد که تلقیحی برای آن انجام نشد نیز در نظر گرفته شد. برای هر تیمار سه تکرار در نظر گرفته شد و طرح به صورت کاملا تصادفی انجام شد. ویالها به مدت شش ساعت مورد انکوباسیون قرار گرفتند. تولید گاز، pH، اسید لاکتیک و اسیدهای چرب فرار، اندازه گیری شدند. نتایج نشان داد که تمام جدایه ها در مقایسه با تیمار ویرجینیا مایسین و تیمار شاهد، غلظت اسیدلاکتیک را کاهش و تولید گاز را افزایش دادند. ولی کمترین غلظت اسیدلاکتیک و بیشترین تولید گاز در تیمار دریافت کننده ی سطح یک میلی لیتر SA3 مشاهده شد. این جدایه همچنین غلظت اسیدهای چرب فرار را به طور معنی داری نسبت به سایر تیمارها افزایش داد. در ازمایش دوم، جدایه ی SA3 انتخاب و اثر آن در خوراک کم یا پرکنسانتره مورد مطالعه قرار گرفت. آزمایش شامل چهار تیمار بود: 1) جیره پرکنسانتره، 2) جیره پرکنسانتره تلقیح شده با باکتری SA3، 3) جیره کم کنسانتره، 4) جیره کم کنسانتره تلقیح شده با باکتری SA3. میزان یک گرم از خوراک کم یا پرکنسانتره و40 میلی لیتر مایع شکمبه درون هر ویال قرار داده شد و 2میلی لیتر از محیط کشت حاوی جدایه ی SA3 به آن تلقیح شد. ویال ها به مدت 9 ساعت مورد انکوباسیون قرار گرفتند. تولیدگاز، pH و
|
|
پژوهشگران
|
داریوش علیپور (استاد راهنما)، رضا صدیقی وثاق (دانشجو)
|