مشخصات پژوهش

عنوان	انتقال ژن بتا – گلوکورونیداز (gus) به فندق (Corylus avellana L.) با استفاده از اگروباکتریوم تومفشینس
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	: فندق. اگروباکتریوم تومفشینس. ژن بتا-گلوکورونیداز. gus
چکیده	فندق با نام علمی Corylus avellana L. گیاهی دولپه ای از بازدانگان در خانواده Betulaceae است. این گیاه در سراسر دنیا در نواحی معتدل از سواحل بریتانیا تا کوه های اورال و شمال غربی ایران پراکنده شده است. در ایران فندق گیاهی بومی در جنگل های ارسباران، تالش، تاروم و زنجان می باشد. مهمترین کشور های تولید کننده فندق در دنیا ترکیه، امریکا، ایتالیا، ایران، چین، اسپانیا، یونان، فرانسه، آذربایجان و قرقیزستان هستند. فندق حاوی 62 درصد روغن و همچنین ویتامین های گروه B، کربوهیدرات، مواد معدنی، فیبر و پروتئین است. اخیرا برخی گزارش ها فعالیت آنتی اکسیدانی و آنتی میکروبی مغز فندق و پوشش سبز آن را نشان داده است. برخی مواد فیتوشیمیایی در این گیاه از جمله گالیک اسید، کافئیک اسید، p- کوماریک اسید و فرولیک اسید وجود دارند که اثرات مثبتی روی سلامتی انسان می گذارند. برخی اندام های فندق حاوی متابولیت های ارزشمند با کاربرد دارویی با نام عمومی تاکسول است. از آنجایی که استفاده از تکنیک های کشت بافت یک ابزار مهم و ضروری در مهندسی ژنتیک و انتقال ژن محسوب می شود در این تحقیق ابتدا شرایط کشت درون شیشه ای فندق و سپس انتقال ژن gus مورد بررسی قرار گرفت. بذور اشکور، الموت، پاییزه و سیاهکل به عنوان ریزنمونه استفاده شد. این ریزنمونه ها به چهار قسمت تقسیم شده و روی محیط کشت MS حاوی 2,4-D (5/0، 1 و 2 میلی گرم در لیتر) در ترکیب با BA (5/0، 1، 2 و 3 میلی گرم در لیتر) و همچنین NAA (5/0، 1 و 2 میلی گرم در لیتر) در ترکیب با BA کشت شدند. درصد القای کالوس در تیمارها و ریزنمونه های مختلف متغیر بود. به منظور القای جنین سوماتیکی کالوس های حاصل شده از تیمار های هورمونی به محیط کشت MS حاوی غلظت های متفاوت 2,4-D، NAA، IBA، TDZ، Kin و BA منتقل شدند. در هیچ یک از تیمار های استفاده شده جنین سوماتیکی مشاهده نشد. در این تحقیق از اگروباکترویم تومفشینس سویه LBA4404 جهت تلقیح کالوس ها استفاده شد. سپس ریزنمونه های تلقیح شده به مدت 2 روز در محیط همکشتی حاوی 100 میلی گرم در لیتر استوسیرینگون نگهداری شدند. پس از گذشت 2 روز ریزنمونه ها به محیط انتخابی حاوی 200 میلی گرم در لیتر کانامایسین منتقل شدند. جهت تایید تراریختی از همه ریزنمونه ها استخراج DNA انجام شد و در حضور پرایمر های اختصاصی، آنالیز PCR انجام گرفت. جهت آزمون هیستوشیمیایی
پژوهشگران	علی دلجو (استاد راهنما)، مهدی بیدابادی (دانشجو)