عنوان
|
بهینه سازی استخراج DNA از گونه های ماکروجلبکی خلیج فارس و دریای عمان
|
نوع پژوهش
|
مقاله ارائه شده کنفرانسی
|
کلیدواژهها
|
ماکروجلبک ،rbcl ترکیبات فنولی، ژن ،DNA استخراج
|
چکیده
|
خالص و کافی از ماکروجلبکها به علت دارا بودن رنج وسیعی از متابولیتهای ثانویه، نحوه اشتباه نمونهبرداری و DNA استخراج خالص جهت مطالعات مولکولی از اهمیت ویژهای DNA خصوصیات مرفولوژیکی آنها، معمولاً مشکل است. از آنجا که استخراج ژنومی با کیفیت و کمیت بالا از نمونههای ماکروجلبکی انجام شد، DNA برخوردار است این مطالعه با هدف استخراج آسان و ارزان تغییر یافته انجام شد و همچنین نیتروژن مایع جهت خرد کردن نمونهها حذف CTAB توسط روش DNA بدین منظور استخراج تغییر یافته، تغییراتی در نسبت حجم بافر استخراج به نمونه، ترکیبات بافر استخراج (افزایش غلظت CTAB گردید. در روش جهت اطمینان از خلوص rbcl بر اساس ژن PCR و سارکوسیل) ایجاد شد. واکنش PVP بتامرکاپتواتانول و افزودن ،EDTA بیشتر A260/A 1 و نسبت 230 /7-1/ بین 84 A260/A استخراجی، نسبت 280 DNA انجام شد. در ارزیابی کمی و کیفی DNA bp باندهایی را در محدوده PCR 6/5-8 اندازهگیری شد. محصولات ug/uL بین DNA از 2 نشان دادهشد و همچنین غلظت CTAB استخراج شده به روش DNA 800-700 در ژل آگارز نشان دادند. ارزیابی کمی و کیفی دادهها، خلوص و میزان بالای از ترکیبات پروتیینی و پلیفنولی/ پلیساکاریدی میباشد. DNA تغییر یافته را نشان دادند، به طوریکه نسبتها نشاندهنده عاری بودن PCR هستند بنابراین نتایج موفقیت آمیز واکنش PCR از آنجا که آلودگیهای پلیساکاریدی و فنولی بازدارنده آنزیمهای واکنش استخراج شده به روش بهینه شده در این DNA . استخراجی و کاربرد آن در مطالعات مولکولی میباشد DNA نشاندهنده خلوص مطالعه، جهت مطالعات مولکولی و نگهداری در بانک ژن مناسب میباشد.
|
پژوهشگران
|
کیانا پیریان (نفر اول)، خسرو پیری (نفر دوم)، سعید تمدنی جهرمی (نفر سوم)، جلوه سهرابی پور (نفر چهارم)
|