مشخصات پژوهش

عنوان	مطالعه پروتئازهای معده میانی سوسک کلرادو سیب زمینی و بازدارنده های پروتئازها
نوع پژوهش	پایان نامه
کلیدواژه‌ها	تریپسین، سرین پروتئازها، کروماتوگرافی، کیموتریپسین
چکیده	سوسک کلرادو سیب زمینی Leptinotarsa decemlineata (Say) (Coleoptera: Chrysomelidae) در 150 سال اخیر آفت عمده مزارع سیب زمینی بوده است. روش های کنترل متفاوتی از جمله تناوب زراعی و آفت کش های شیمیایی به منظور کاهش تاثیر این آفت بر مزارع سیب زمینی به کار برده می شوند. سوسک کلرادو سیب زمینی از جمله آفاتی است که در صورت عدم کنترل با مصرف بالای برگ می تواند به محصولات آسیب جدی وارد کند. این آفت به دلیل گسترش جهانی و افزایش جمعیت روبه رشد خود، به یک پدیده نگران کننده تبدیل شده است. در حال حاضر حشره-کش های شیمیایی بیشترین تاثیر را در کنترل این آفت دارند. متاسفانه استفاده منحصر به فرد از سموم برای کنترل آفت بعد از چند سال باعث عدم تاثیر آنها می شود، چرا که این حشرات به طور موفقیت آمیزی مقاومت شان را در برابر چنین مواد شیمیایی افزایش داده اند. همچنین استفاده بیش از حد و کنترل نشده از حشره کش های شیمیایی برای تولیدکنندگان سیب زمینی پرهزینه است و می تواند به ایجاد مشکلات جدی برای سلامت انسان و محیط زیست منجر شود. سرین پروتئازهای دستگاه گوارش در برخی از سخت بالپوشان از آنزیم های عمده در بین آنزیم های پروتئولیتیک هستند. این آنزیم ها به اهداف مهم برای کنترل آفات با استفاده از بازدارنده های پپتیداز جدا شده از گیاهان تبدیل شده-اند. در این تحقیق، فعالیت پروتئولیتیک کل، فعالیت تریپسین و کیموتریپسین مورد مطالعه قرار گرفت. pH بهینه برای فعالیت پروتئولیتیک روده میانی در لارو و حشرات کامل به ترتیب 8 و 7 به دست آمد. زایموگرام حاصل از فعالیت تریپسین و کیموتریپسین برای پروتئین های روده لارو و حشرات کامل بصورت دو باند صورتی برای تریپسین و یک باند صورتی برای کیموتریپسین بود. مقدار فعالیت ویژه برای تریپسین و کیموتریپسین در حشرات کامل و لارو به ترتیب 06/7، 12/7 و 127/6 ، 616/5 یونیت بر میلی گرم به دست آمد. علاوه بر این اثر بازدارندگی بازدارنده جدا شده از بذر 9 لاین رقم گندم دنا، بر فعالیت پروتئولیتیک مورد مطالعه قرار گرفت. در نهایت پروتئین بازدارنده استخراج شده از لاین Edit, M,12 دارای بیشترین مهارکنندگی روی فعالیت پروتئولیتیک لارو و حشرات کامل بود. همچنین آنزیم های پروتئاز روده معده میانی لارو توسط کروماتوگرافی تعویض یونی با استفاده از DEAE-cellulose و کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون با استفاده از سفا
پژوهشگران	مجید کزازی (استاد راهنما)، مرضیه صفرالهی (دانشجو)، وحید حسینی نوه (استاد مشاور)