ژن پرولاکتین یکی از ژن های عمده مؤثر بر تولید شیر است و جستجو برای یافتن چندشکلی های مرتبط با صفات تولید شیر در آن، برای طرح ریزی برنامه اصلاح نژادی برای بهبود ژنتیکی گاوهای شیری ضروری است. این مطالعه با هدف بررسی چندشکلی ژنتیکی ژن پرولاکتین و ارتباط آن با صفات تولید شیر در جمعیتی از گاوهای هلشتاین ایران انجام شد. نمونه های خون به طور تصادفی از154 گاو هلشتاین متعلق به دو گله جمع آوری شدند. پس از استخراج DNA ژنومی، واکنش زنجیره ای پلیمراز برای تکثیر یک قطعه 291 جفت بازی در اگزون 5 و یک قطعه 181 جفت بازی از اگزون 2 ژن پرولاکتین انجام شد. چندشکلی های قطعات تکثیرشده با روش های چند شکلی فضایی رشته های منفرد و توالی یابی مورد بررسی قرار گرفت. ارتباط ژنوتیپ های مشاهده شده و صفات تولیدی، شامل تولید شیر، تولید چربی، تولید پروتئین، درصد چربی و درصد پروتئین، توسط تجزیه مدل های خطی عمومی، با نرم افزار SAS بررسی شد، که در آن دوره شیردهی، گله و ژنوتیپ به عنوان عوامل ثابت در نظر گرفته شدند. در جمعیت مورد بررسی اگزون 2 ژن پرولاکتین تک شکل بود اما در جایگاه 213 جفت بازی اگزون 5، یک جهش A به T مشاهده شد. فراوانی ژنوتیپ های AA، AT وTT در این جایگاه، به ترتیب 461/0، 526/0 و 013/0 بود. این جهش جهشی خاموش، بدون تأثیر در تغییر توالی اسیدهای آمینه کدشده بود. صفات مورد بررسی، ارتباط معنی داری با ژنوتیپ های مشاهده شده نداشتند. با توجه به نتایج به دست آمده از این پژوهش، به نظر نمی رسد که چندشکلی مشاهده شده در اگزون 5 ژن پرولاکتین، بتواند در انتخاب با کمک نشانگرها به کار برده شود.