مجید کزازی

سرخرطومی یونجه مهمترین آفت مزارع یونجه در ایران و بسیاری از نقاط دنیا می باشد. اختلال در سیستم گوارشی حشرات آفت و بر هم زدن مسیرهای متابولیسمی گوارشی مانند استفاده از پروتیین های گیاهی مهار کننده آنزیم های گوارشی همواره یکی از راههای مقابله با آنهاست. بدین منظور از بافت تازه 7 گیاه شامل: پوست موز، پوست پرتقال، پوست و گوشت سیب، پیازچه، تربچه، میوه گوجه فرنگی و فلفل تند سبز اقدام به استخراج مهارکننده پکتینازی گردید. در این میان بیشترین مهارکنندگی مربوط به فلفل تند سبز بود که به طور کامل در تست تیوب و آزمون زایموگرام فعالیت عصاره پروتیینی استخراجی از روده میانی لارو سن 4 سرخرطومی یونجه را روی سوبسترای اختصاصی پکتین مهار شد. لازم به ذکر است که پروتیین استخراجی از میوه گوجه فرنگی نیز 94% مهار کنندگی از خود نشان داد. پروتیین استخراج شده از فلفل برای خالص سازی انتخاب شد و بواسطه ستون 100 سانتی متری کروماتوگرافی پر شده با رزین Sephadex® G-100 در 150 فراکشن 2 میلی لیتری مورد خالص سازی قرار گرفت. فراکشن های دارای فعالیت مهار کنندگی جدا شده و به ستون 25 سانتی متری تعویض یونی Ion exchange پر شده باDEAE Macro-Prep®منتقل شد. تعداد 5 فراکشن نیز بواسطه این ستون به کمک غلظت های مختلف NaCl(0.1، 0.2، 0.4، 0.8 و 1 مولار) استخراج شد و نمونه های دارای پروتیین(280 نانومتر) و فعالیت پروتیینی جداسازی شدند.