2025 : 4 : 21
Gholam Khodakaramian

Gholam Khodakaramian

Academic rank: Professor
ORCID:
Education: PhD.
ScopusId: 18935259800
HIndex:
Faculty: Faculty of Agriculture
Address:
Phone: 08134424091

Research

Title
شناسایی باکتری های همزیست غالب دستگاه گوارش بید غلاتSitotorga cerealella
Type
JournalPaper
Keywords
باکتری های همزیست، بید غلات، دستگاه گوارش حشرات
Year
2021
Journal فصلنامه تخصصی تحقیقات حشره شناسی
DOI
Researchers Majid Kazzazi ، ، Gholam Khodakaramian ، ezatolah sedaghat far

Abstract

بید غلات از آفات مهم انباری است خسارت این آفت هم از نظر کیفیت و هم از لحاظ کمی دارای اهمیت زیاد است. در این پژوهش ، باکتریهای همزیست دستگاه گوارش بید غلات شناسایی شد. برای پرورش بید از غلات از جو اصلاح شده رقم آبیدر با درصد پروتئین بالا استفاده شد. ظرف حاوی جو بعد آلوده سازی در اطاقک رشد در شرایط دمایی 24±1 درجه سلسیوس و رطوبت نسبی 65±5 درصد نگهداری شدند. جهت جدا نمودن باکتری های دستگاه گوارش بید غلات از بین جمعیت پرورش داده شده 10 لارو سالم انتخاب شد. دستگاه گوارش لاروها پس از ضدعفونی در اتانول 70 درصد، هیپوکلریت سدیم 5 درصد و آب مقطر خارج شد. سپس جهت همگن نمودن دستگاه گوارش از یک میلی لیتر بافر فسفات 0.1 مولار با pH=7 استفاده شد. محتویات همگن و رقیق شده در محیط کشت نوترینت آگار کشت داده شد. برای انجام واکنشهای زنجیره ای پلیمراز از 5 میکرولیتر Master Mix، 2 میکرولیتر DNA استخراج شده ، 1.5 میکرولیتر پرایمر RP2 و 1.5 میکرولیتر پرایمر FD1 و 15 میکرولیتر Distilled Water که حجم کلی این مواد باید به 25 میکرولیتر برسد. فرآیند PCR لا استفاده از پرایمرهای عمومی FD1 و RP2 و توالی ژن 16srRNA در دستگاه ترموسایکلر انجام شد. توالی یابی محصول PCR تهیه شده با همکاری شرکت Bioneer کره جنوبی انجام شد و نتایج در سایت NCBI مورد بررسی قرار گرفت. ویژگی های فنوتیپی باکتری های جدا شده با روشهای استاندارد باکتری شناسی مشخص شد. بعد از بررسی تمامی کلونی های تهیه شده و مقایسه نتایج بدست آمده بیشترین فراوانی از نظر تعداد کلونی مختص به باکتری Enterococcus mundtii بود و باکتری Enterobacter hormaechei از فراوانی کمتری در دستگاهگوارش بید برخوردار بود. همچنین با توجه به الکتروفورز انجام شده بالاترین باندهای مشاهده شده مربوط به باکتری Enterobacter hormaechei و کوتاهترین باند متعلق به Enterococcus mundtii میباشد.