غلام خداکرمیان

در سال های اخیر، توجه زیادی به امکان کنترل بیولوژیکی عوامل بیماریزای گیاهی با استفاده از میکروارگانیسم های آنتاگونیست به خصوص باکتری سودوموناس فلورسنت شده است. این میکروارگانیسم ها، در ناحیه ی رایزوسفر گیاهان زندگی می کنند و گزینه ی مناسبی برای استفاده در روش های کنترل بیولوژیک هستند، زیرا رایزوسفر خط مقدم دفاعی ریشه ها علیه بیمار گر های خاکزی است. به علت خطر ات و مشکلات استفاده از آفت کش های شیمیایی، این گروه باکتریایی از اهمیت بسزایی در برنامه ی کنترل بیولوژیک برخوردار ند و می توانند برای مرحله ی تولید مورد توجه و بررسی قرار بگیرند .با توجه به سطح زیر کشت بالای یونجه در کشور، به خصوص در استان همدان و اهمیت استراتژیک آن به عنوان گیاه علوفه ای زراعی و با توجه به مشاهده بیماری پژمردگی باکتریایی ناشی از Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus (Cmi)در برخی از مناطق استان، جدا سازی و شناسایی استرین های سودوموناس فلورسنت که طیف نسبتاّ وسیعی از متابولیت های ضد میکروبی را تولید می کنند ضروری می باشد. به منظور جدا سازی عوامل باکتریایی بیو کنترلی، در بهار و تابستان 1394 از خاک رایزوسفر مزارع یونجه ی شهرستان های مختلف استان همدان به صورت تصادفی نمونه برداری انجام شد. جهت جدا سازی باکتری ها، سری رقت از سوسپانسیون خاک تهیه گردید و در محیط کشت(NA) کشت شد. کلنی-هایی که دارای ویژگی های مشابه به جنس سودوموناس بودند جداسازی و خالص سازی شدند. جهت شناسایی سودوموناس های فلورسنت، از محیط کشت King B استفاده شد،که تولید رنگ سبز فلورسنت در این محیط مشاهده شد. تعداد 150 ایزوله ی باکتریایی به عنوان سودوموناس فلورسنت شناخته شد که بررسی توان بازدارند گی استرین های P. flourescensعلیه باکتری عامل پژمردگی یونجه، به روش کشت سه نقطه ای در محیط (NA) انجام شد. سپس با برداشتن کلنی استرین های سودوموناس فلورسنت و سترون کردن محیط با کلروفرم، سوسپانسیون عامل بیماریزا در پتری دیش ها اضافه شد. این آزمون، در قالب طرح کاملا تصادفی و با سه تکرار انجام شد. اثر آنتاگونیستی استرین ها با اندازه گیری قطر هاله های ایجاد شده، مشخص شد و داده ها با نرم افزار SASدر قالب طرح کاملا تصادفی و در سطح احتمال آماری یک درصد آنالیز شد. گروه های آماری بر اساس قطر هاله و درصد بازدارند گی تعیین شدند. ارزیابی توان بیو کنترلی این