غلام خداکرمیان

: یونجه (. (medicago sativa Lبعنوان گیاه علوفه ای زراعی، سطح زیر کشت وسیعی در کشور به خصوص در استان همدان دارد. بیماری پژمردگی باکتریایی یونجه ناشی از Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus (Cmi)، بعنوان یکی از بیماری های مهم یونجه در استان همدان بشمار می رود. به علت مخاطرات کاربرد آفت کش های شیمیایی جدا سازی و شناسایی استرین های سودوموناس فلورسنت که طیف وسیعی از متابولیت های ضدمیکروبی را تولید می کنند، اهمیت بسزایی در برنامه های کنترل بیولوژیک دارد. سودوموناس های فلورسنت باکتری های بی نظیری هستند که معمولا در رایزوسفر بازدارنده هستند و به دلیل فراوانی شان دررایزوسفروتواناییشان برای تحریک رشد گیاه، هم به وسیله ی تحریک مستقیم و یا سرکوب پاتوژن بیماریزای ریشه ی گیاه جزء گروه بسیار مطالعه شده هستند. این پژوهش، به منظور ارزیابی تاثیرات آنتاگونیستی بیووار های Pseudomonas fluorescens علیه عامل پژمردگی باکتریایی یونجه Cmi انجام شد. برای این منظور، در بهار و تابستان 1394 از خاک رایزوسفری یونجه، از مزارع شهرستان های مختلف استان همدان به صورت تصادفی نمونه برداری انجام شد. سری رقت از سوسپانسیون خاک تهیه گردید و در نوترینت آگار(NA) کشت شد. کلنی هایی که دارای ویژگی های مشابه به جنس سودوموناس بودند جدا سازی، با کشت روی محیط King’s Bشناسایی و ویژگی های فنوتیپی جدایه ها بررسی شد. بررسی توان بازدارند گی جدایه های P. flourescensعلیه باکتری Cmi، به روش کشت سه نقطه ای در محیط کشت NA انجام شد. این آزمون، در قالب طرح کاملا تصادفی و با سه تکرار انجام شد. اثر آنتاگونیستی استرین ها با اندازه گیری قطر هاله های ایجاد شده، مشخص شد و داده ها با نرم افزار SASدر سطح احتمال آماری یک درصد آنالیز شد.. ارزیابی توان بیو کنترلی این استرین ها علیه cmi در شرایط آزمایشگاهی نشان داد، اکثر این استرین ها، توانایی بازدارند گی از رشد باکتری بیماریزا را دارند. استرین های 115MA، 89 MA، 88 MAبه ترتیب با میانگین قطر هاله ی 53/4، 20/4، 06/4 سانتی متر بیشترین و 5MA، 34MA، 20MA، به ترتیب 03/2، 43/1، 43/1 سانتی متر کمترین درصد بازدارند گی از رشد را در مقایسه با شاهد داشتند. از بین این جدایه ها و بر مبنای آزمون بازدارند گی در شرایط آزمایشگاهی، تست های فنوتیپی و الگوی الکتروفورز پرتئینی، 11 جدایه نماینده برای بررسی