غلام خداکرمیان

کشاورزی مولکولی به تولید پروتئینهای دارویی و آنزیمهای صنعتی توسط گیاهان از طریق پلیمراز یکی از مهمترین آنزیمهاست که به طور T7RNA مهندسی ژنتیک اطلاق میشود. آنزیم وسیعی در زمینههای مختلف بیوتکنولوژی و زیستشناسی سلولی و مولکولی، از قبیل سنتز و مطالعه های سنتز شده در RNA . ها در شرایط آزمایشگاهی استفاده میشود RNA ساختار و عملکرد آنتیسنس کاربرد RNA و RNAi شرایط آزمایشگاهی در هیبریداسیون، ریزآرایه، آزمایشات کاربرد فراوان T دارد. این آنزیم همچنین در سیستمهای بیانی وابسته به پیشبر و خاتمه دهنده 7 پلیمراز یک آنزیم باکتریوفاژی بوده و فعالیت اصلی آن در سیتوپلاسم می- T7RNA دارد. آنزیم پلیمراز به هسته سلولهای T7RNA باشد. تحقیق حاضر جهت همسانهسازی، انتقال ژن آنزیم یوکاریوتی و تولید آن در گیاه توتون انجام گرفت. آغازگرهای مناسب از روی توالی ژن T7RNA پلیمراز به همراه توالیهای مناسب برای آنزیمهای برشی، طراحی و ژن T7RNA همسانهسازی شد. به منظور pCAMBIA پلیمراز مورد نظر پس از جداسازی در ناقل بیانی 1304 هضم آنزیمی و توالییابی بررسی ،PCR اطمینان از همسانهسازی، سازه تهیه شده با استفاده از شده و همردیفی آن در بانک اطلاعاتی اسیدهای نوکلئیک تأیید گردید. سپس، سازه نوترکیب به آگروباکتریوم به گیاهان توتون منتقل و گیاهان تراریخته بر روی محیط - LB کمک سویه 4404 های کشت انتخابی حاوی آنتیبیوتیکهای هیگرومایسین و سفوتاکسیم، باززا شدند. حضور و بیان تأیید شد. RT- PCR و PCR پلیمراز در گیاهان تراریخته با روشهای T7RNA ژن